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如何用離心機(jī)進(jìn)行兩蟲的檢測(cè)
點(diǎn)擊次數(shù)：2933 更新時(shí)間：2017-07-18
賈第鞭毛蟲與隱孢子蟲（簡(jiǎn)稱“兩蟲”）是兩種嚴(yán)重危害飲用水水質(zhì)安全的病原微生物。“兩蟲”具有個(gè)體微小，致病量低、感染途徑和方式簡(jiǎn)單,流行分布廣泛的特點(diǎn)。2006年我國(guó)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》增加了“兩蟲”檢測(cè)，規(guī)定每10L小于1個(gè)孢囊或卵囊。今天小編為大家介紹如何用離心機(jī)來(lái)進(jìn)行兩蟲的檢測(cè)。
首先要進(jìn)行接種和樣品的淘洗和濃縮，然后開始離心。
a. 離心機(jī)應(yīng)放在牢固的工作臺(tái)或地板上，盡量減少晃動(dòng)。
b. 平衡對(duì)稱的離心管，和適配器、離心桶一起平衡，重量差別不超過(guò)0.5g， 盡量減少擺動(dòng)。注意：如果離心管不被平衡則會(huì)產(chǎn)生額外的震動(dòng)，影響到目標(biāo)物的沉淀。
c. 設(shè)置離心機(jī)參數(shù)2000g，15min。樣品在離心機(jī)中自然慣性停止，不可使用剎車系統(tǒng)急停。
d.用真空泵或蠕動(dòng)泵吸取離心管中的上清液，在進(jìn)口處裝一個(gè)移液器以減少進(jìn)口的真空力度。zui終留取5-8ml（可預(yù)先在管上做好標(biāo)記）。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心，接近液面處上吸取上清液，以減少沉淀的損失。
e. 將離心管中的剩余的濃縮液在渦旋混合器上混勻20秒。
f. 用緩沖液潤(rùn)洗移液器將所有液體轉(zhuǎn)移至L型試管中。（注意：移液器需要用緩沖液潤(rùn)洗下，是為了避免移液管壁因干燥而將兩蟲掛壁。）
g. 使用純水清洗兩次移液管（如剩余體積為7ml,則每次1.5ml）,并將清洗 液移入同一個(gè)L型試管中，每次沖洗后都要停留20秒再移出液體。
離心機(jī)離心和移液結(jié)束后，再進(jìn)行兩蟲的捕獲和染色，zui后分析免疫熒光檢驗(yàn)的結(jié)果就可以判斷兩蟲的情況了。
首先要進(jìn)行接種和樣品的淘洗和濃縮，然后開始離心。
a. 離心機(jī)應(yīng)放在牢固的工作臺(tái)或地板上，盡量減少晃動(dòng)。
b. 平衡對(duì)稱的離心管，和適配器、離心桶一起平衡，重量差別不超過(guò)0.5g， 盡量減少擺動(dòng)。注意：如果離心管不被平衡則會(huì)產(chǎn)生額外的震動(dòng)，影響到目標(biāo)物的沉淀。
c. 設(shè)置離心機(jī)參數(shù)2000g，15min。樣品在離心機(jī)中自然慣性停止，不可使用剎車系統(tǒng)急停。
d.用真空泵或蠕動(dòng)泵吸取離心管中的上清液，在進(jìn)口處裝一個(gè)移液器以減少進(jìn)口的真空力度。zui終留取5-8ml（可預(yù)先在管上做好標(biāo)記）。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心，接近液面處上吸取上清液，以減少沉淀的損失。
e. 將離心管中的剩余的濃縮液在渦旋混合器上混勻20秒。
f. 用緩沖液潤(rùn)洗移液器將所有液體轉(zhuǎn)移至L型試管中。（注意：移液器需要用緩沖液潤(rùn)洗下，是為了避免移液管壁因干燥而將兩蟲掛壁。）
g. 使用純水清洗兩次移液管（如剩余體積為7ml,則每次1.5ml）,并將清洗 液移入同一個(gè)L型試管中，每次沖洗后都要停留20秒再移出液體。
離心機(jī)離心和移液結(jié)束后，再進(jìn)行兩蟲的捕獲和染色，zui后分析免疫熒光檢驗(yàn)的結(jié)果就可以判斷兩蟲的情況了。
